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Calculadora de la ley de Beer-Lambert (A = εlc)
En resumen: calculadora de la ley de Beer-Lambert: resuelve A = εlc para absorbancia, ε, longitud de paso o concentración, convierte %T en absorbancia y halla una concentración desconocida con una curva de calibración. Es gratuita, funciona en tu navegador y no requiere descarga.
Introduce tres valores cualesquiera entre absorbancia, absortividad molar, longitud de paso y concentración para hallar el cuarto. Elige mol/L, mmol/L o µmol/L y cm o mm. Cambia al modo de calibración para pegar tus patrones y obtener la recta de mejor ajuste, el R² y la concentración desconocida.
Rellena tres valores y deja en blanco el que quieras hallar.
Transmitancia ↔ absorbancia
Fórmulas de la ley de Beer-Lambert
A = ε × l × c c = A / (ε l) ε = A / (l c) l = A / (ε c)
A = −log₁₀ T = log₁₀(I₀/I) A = 2 − log₁₀(%T) %T = 10^(2 − A)
A es la absorbancia (sin unidades). ε es la absortividad molar (también llamada coeficiente de extinción molar) en L mol⁻¹ cm⁻¹. l es la longitud de paso en cm. c es la concentración en mol/L. Una cubeta estándar tiene l = 1,00 cm.
| Absorbancia A | 0 | 0.1 | 0.3 | 0.5 | 1.0 | 2.0 | 3.0 |
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| % transmitido | 100 | 79.4 | 50.1 | 31.6 | 10 | 1 | 0.1 |
Curva de calibración
Mide varios patrones de concentración conocida y representa A frente a c. Una recta de mínimos cuadrados A = m·c + b da la pendiente m = εl. Calcula una muestra desconocida con c = (A − b)/m. Un R² cercano a 1 (por encima de aproximadamente 0,995) indica una buena recta. Confía solo en resultados dentro del intervalo de tus patrones.
Ejemplos resueltos
Concentración de NADH
El NADH tiene ε = 6220 L mol⁻¹ cm⁻¹ a 340 nm. Una muestra en una cubeta de 1,00 cm marca A = 0,311.
c = A/(εl) = 0,311 / (6220 × 1,00)
c = 5,00 × 10⁻⁵ M = 50,0 µM
De transmitancia a absorbancia
Una disolución transmite el 25,0 % de la luz. Halla A.
A = 2 − log₁₀(25,0) = 2 − 1,398
A = 0,602
Hallar ε (estilo AP)
Una disolución de colorante 2,50 × 10⁻⁵ M en una cubeta de 1,00 cm tiene A = 0,452.
ε = A/(lc) = 0,452 / (1,00 × 2,50 × 10⁻⁵)
ε = 1,81 × 10⁴ L mol⁻¹ cm⁻¹
Dilución más Beer-Lambert (estilo JEE)
Una disolución madre se diluye 10 veces. La disolución diluida da A = 0,250 con ε = 5000 L mol⁻¹ cm⁻¹ y l = 1 cm.
c diluida = 0,250/5000 = 5,0 × 10⁻⁵ M. Multiplica por el factor de dilución.
Disolución madre = 5,0 × 10⁻⁴ M
Concentración desconocida a partir de una curva de calibración
Patrones de 0 a 50 µM dan A = 0,01231·c + 0,0013 (R² = 0,99998). La muestra desconocida marca A = 0,300.
c = (0,300 − 0,0013) / 0,01231
c ≈ 24,3 µM (ε ≈ 1,23 × 10⁴ L mol⁻¹ cm⁻¹)
Duplicar la longitud de paso
A = 0,40 en una cubeta de 1 cm. La misma disolución se coloca en una cubeta de 2 cm.
A es proporcional a l, así que A se duplica.
A = 0,80 (el %T baja del 39,8 % al 15,8 %)
Unidades y errores comunes
- Longitud de paso en cm. 10 mm = 1 cm. Una cubeta de 5 mm mide 0,5 cm, no 5.
- Concentración en mol/L. Convierte primero µM o mM, o deja que lo haga la calculadora. Si ε se da por mg/mL (o como A para 1 mg/mL), usa la concentración en masa.
- La absorbancia no tiene unidades. No escribas «A = 0,5 M». Las unidades de ε cancelan las de l y c.
- Usa logaritmo en base 10. A = −log₁₀T. Usar ln da valores 2,303 veces demasiado grandes.
- %T o T. T es una fracción (0,25). %T es un porcentaje (25). A = −log T = 2 − log %T.
- Mantente en el intervalo lineal. La mayoría de los espectrofotómetros son fiables para A entre aproximadamente 0,1 y 1,0. Por encima de 1,5, la luz parásita y los efectos químicos curvan la recta. Diluye la muestra.
- Primero el blanco. Pon a cero el instrumento con el disolvente (y los reactivos) para que A provenga solo del analito.
- Mide a λmáx. ε depende de la longitud de onda. Usa la misma longitud de onda para los patrones y las muestras desconocidas.
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Abrir el editor MolDrawPreguntas frecuentes
¿Qué es la ley de Beer-Lambert?
Establece que la absorbancia es proporcional a la concentración y a la longitud de paso: A = εlc. Si duplicas la concentración o la longitud de paso, la absorbancia se duplica. Se cumple bien en disoluciones diluidas a una sola longitud de onda.
¿Cuáles son las unidades de la absortividad molar ε?
L mol⁻¹ cm⁻¹ (también escrito M⁻¹ cm⁻¹). Estas unidades hacen que A = εlc sea adimensional cuando l está en cm y c en mol/L. Los colorantes muy absorbentes tienen ε por encima de 10⁴; las transiciones d–d débiles pueden estar por debajo de 100.
¿Cómo convierto la transmitancia en absorbancia?
A = −log₁₀T, o A = 2 − log₁₀(%T). Por ejemplo, 50 % T da A = 0,301, 10 % T da A = 1 y 1 % T da A = 2.
¿Por qué mi curva de calibración no es recta a absorbancias altas?
Por encima de aproximadamente A = 1 a 1,5 llega muy poca luz al detector, así que la luz parásita y el ruido influyen. Las disoluciones concentradas también pueden presentar interacciones moleculares. Diluye las muestras hasta el intervalo lineal.
¿Qué significa la pendiente de una gráfica de absorbancia frente a concentración?
La pendiente es igual a εl. Con una cubeta de 1 cm, la pendiente (en L/mol) es la absortividad molar ε. Si la concentración está en µM, divide la pendiente entre 10⁻⁶ para obtener ε en L mol⁻¹ cm⁻¹.
¿Debe pasar por cero una recta de calibración?
Idealmente sí, después de hacer el blanco. Una pequeña ordenada en el origen es normal por errores del blanco y de la cubeta. Esta calculadora ajusta la ordenada en el origen en lugar de forzarla a cero, y la usa al calcular la muestra desconocida.
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