MolDraw › Scheikundetools › Calculator voor de wet van Lambert-Beer

Calculator voor de wet van Lambert-Beer (A = εlc)

Kort gezegd: calculator voor de wet van Lambert-Beer: los A = εlc op voor extinctie, ε, weglengte of concentratie, reken %T om naar extinctie en bepaal een onbekende met een ijklijn. Het is gratis, werkt in je webbrowser en je hoeft niets te downloaden.

Voer drie van extinctie, molaire extinctiecoëfficiënt, weglengte en concentratie in om de vierde te vinden. Kies mol/L, mmol/L of µmol/L en cm of mm. Schakel over naar de ijklijnmodus om je standaarden te plakken en krijg de best passende lijn, R² en de onbekende concentratie.

Snel antwoord: A = ε × l × c. NADH (ε = 6220 L mol⁻¹ cm⁻¹ bij 340 nm) met A = 0,311 in een cuvet van 1 cm is 5,00 × 10⁻⁵ M (50 µM). Reken transmissie om met A = 2 − log₁₀(%T).

Vul drie waarden in en laat de waarde die je zoekt leeg.

Extinctie A (zonder eenheid)Molaire extinctiecoëfficiënt ε (L mol⁻¹ cm⁻¹)

Weglengte lEenheid

Concentratie cEenheid

Transmissie ↔ extinctie

Procentuele transmissie %TExtinctie A

Formules van de wet van Lambert-Beer

A = ε × l × c c = A / (ε l) ε = A / (l c) l = A / (ε c) A = −log₁₀ T = log₁₀(I₀/I) A = 2 − log₁₀(%T) %T = 10^(2 − A)

A is de extinctie of absorbantie (zonder eenheid). ε is de molaire extinctiecoëfficiënt (ook molaire absorptiecoëfficiënt) in L mol⁻¹ cm⁻¹. l is de weglengte in cm. c is de concentratie in mol/L. Een standaardcuvet heeft l = 1,00 cm.

Extinctie A	0	0.1	0.3	0.5	1.0	2.0	3.0
% doorgelaten	100	79.4	50.1	31.6	10	1	0.1

IJklijn

Meet meerdere standaarden met bekende concentratie en zet A uit tegen c. Een kleinstekwadratenlijn A = m·c + b geeft de helling m = εl. Lees een onbekende af met c = (A − b)/m. R² dicht bij 1 (boven ongeveer 0,995) wijst op een goede rechte lijn. Vertrouw alleen resultaten binnen het bereik van je standaarden.

Uitgewerkte voorbeelden

Concentratie van NADH

NADH heeft ε = 6220 L mol⁻¹ cm⁻¹ bij 340 nm. Een monster in een cuvet van 1,00 cm geeft A = 0,311.

c = A/(εl) = 0,311 / (6220 × 1,00)

c = 5,00 × 10⁻⁵ M = 50,0 µM

Van transmissie naar extinctie

Een oplossing laat 25,0% van het licht door. Bereken A.

A = 2 − log₁₀(25,0) = 2 − 1,398

A = 0,602

ε bepalen (AP-stijl)

Een kleurstofoplossing van 2,50 × 10⁻⁵ M in een cuvet van 1,00 cm heeft A = 0,452.

ε = A/(lc) = 0,452 / (1,00 × 2,50 × 10⁻⁵)

ε = 1,81 × 10⁴ L mol⁻¹ cm⁻¹

Verdunning plus Lambert-Beer (JEE-stijl)

Een stamoplossing wordt 10 keer verdund. De verdunde oplossing geeft A = 0,250 met ε = 5000 L mol⁻¹ cm⁻¹ en l = 1 cm.

Verdunde c = 0,250/5000 = 5,0 × 10⁻⁵ M. Vermenigvuldig met de verdunningsfactor.

Stamoplossing = 5,0 × 10⁻⁴ M

Onbekende uit een ijklijn

Standaarden van 0 tot 50 µM geven A = 0,01231·c + 0,0013 (R² = 0,99998). De onbekende geeft A = 0,300.

c = (0,300 − 0,0013) / 0,01231

c ≈ 24,3 µM (ε ≈ 1,23 × 10⁴ L mol⁻¹ cm⁻¹)

Dubbele weglengte

A = 0,40 in een cuvet van 1 cm. Dezelfde oplossing gaat in een cuvet van 2 cm.

A is evenredig met l, dus A verdubbelt.

A = 0,80 (%T daalt van 39,8% naar 15,8%)

Eenheden en veelgemaakte fouten

Weglengte in cm. 10 mm = 1 cm. Een cuvet van 5 mm is 0,5 cm, niet 5.
Concentratie in mol/L. Reken µM of mM eerst om, of laat de calculator dat doen. Is ε gegeven per mg/mL (of als A bij 1 mg/mL), gebruik dan de massaconcentratie.
Extinctie heeft geen eenheid. Schrijf niet "A = 0,5 M". De eenheden van ε heffen die van l en c op.
Gebruik log met grondtal 10. A = −log₁₀T. Met ln krijg je waarden die 2,303 keer te groot zijn.
%T of T. T is een fractie (0,25). %T is een percentage (25). A = −log T = 2 − log %T.
Blijf in het lineaire gebied. De meeste spectrofotometers zijn betrouwbaar voor A tussen ongeveer 0,1 en 1,0. Boven ongeveer 1,5 buigen strooilicht en chemische effecten de curve af. Verdun in dat geval het monster.
Eerst een blanco. Stel het instrument op nul met het oplosmiddel (en de reagentia), zodat A alleen van de analyt komt.
Meet bij λmax. ε hangt af van de golflengte. Gebruik dezelfde golflengte voor standaarden en onbekenden.

Een verslag van een spectroscopieproef schrijven? Teken de chromofoor en je reactieschema in MolDraw, een gratis online editor voor chemische structuren.

MolDraw-editor openen

Veelgestelde vragen

Wat is de wet van Lambert-Beer?

Ze zegt dat de extinctie (absorbantie) evenredig is met concentratie en weglengte: A = εlc. Verdubbel de concentratie of de weglengte en de extinctie verdubbelt. Ze geldt goed voor verdunde oplossingen bij één golflengte.

Wat zijn de eenheden van de molaire extinctiecoëfficiënt ε?

L mol⁻¹ cm⁻¹ (ook geschreven als M⁻¹ cm⁻¹). Met deze eenheden is A = εlc dimensieloos als l in cm en c in mol/L staat. Sterk absorberende kleurstoffen hebben ε boven 10⁴; zwakke d–d-overgangen kunnen onder 100 liggen.

Hoe reken ik transmissie om naar extinctie?

A = −log₁₀T, of A = 2 − log₁₀(%T). Zo geeft 50% T A = 0,301, 10% T geeft A = 1 en 1% T geeft A = 2.

Waarom is mijn ijklijn niet recht bij hoge extinctie?

Boven ongeveer A = 1 tot 1,5 bereikt maar weinig licht de detector, dus strooilicht en ruis gaan meetellen. Geconcentreerde oplossingen kunnen ook moleculaire wisselwerkingen vertonen. Verdun monsters tot in het lineaire gebied.

Wat betekent de helling van een grafiek van extinctie tegen concentratie?

De helling is gelijk aan εl. Met een cuvet van 1 cm is de helling (in L/mol) de molaire extinctiecoëfficiënt ε. Staat de concentratie in µM, deel de helling dan door 10⁻⁶ voor ε in L mol⁻¹ cm⁻¹.

Moet een ijklijn door nul gaan?

In het ideale geval wel, na het nulstellen met een blanco. Een klein snijpunt is normaal door fouten in blanco en cuvet. Deze calculator past het snijpunt mee aan in plaats van het op nul te dwingen, en gebruikt het bij het bepalen van de onbekende.

Gerelateerde scheikundetools

Laatst bijgewerkt: 18 oktober 2026