MolDraw › Alat kimia › Kalkulator Hukum Beer–Lambert
Kalkulator Hukum Beer–Lambert (A = εlc)
Singkatnya: Kalkulator hukum Beer–Lambert: selesaikan A = εlc untuk absorbansi, ε, panjang lintasan, atau konsentrasi, ubah %T menjadi absorbansi, dan cari konsentrasi sampel dari kurva kalibrasi. Gratis, berjalan di peramban web Anda, dan tidak perlu diunduh.
Masukkan tiga dari absorbansi, absorptivitas molar, panjang lintasan, dan konsentrasi untuk mencari yang keempat. Pilih mol/L, mmol/L, atau µmol/L dan cm atau mm. Beralih ke mode kalibrasi untuk menempelkan data standar Anda dan mendapatkan garis terbaik, R², serta konsentrasi sampel.
Isi tiga nilai dan biarkan nilai yang ingin dicari kosong.
Transmitansi ↔ absorbansi
Rumus hukum Beer–Lambert
A = ε × l × c c = A / (ε l) ε = A / (l c) l = A / (ε c)
A = −log₁₀ T = log₁₀(I₀/I) A = 2 − log₁₀(%T) %T = 10^(2 − A)
A adalah absorbansi (tanpa satuan). ε adalah absorptivitas molar (disebut juga koefisien ekstingsi molar) dalam L mol⁻¹ cm⁻¹. l adalah panjang lintasan dalam cm. c adalah konsentrasi dalam mol/L. Kuvet standar memiliki l = 1,00 cm.
| Absorbansi A | 0 | 0.1 | 0.3 | 0.5 | 1.0 | 2.0 | 3.0 |
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| % diteruskan | 100 | 79.4 | 50.1 | 31.6 | 10 | 1 | 0.1 |
Kurva kalibrasi
Ukur beberapa standar dengan konsentrasi yang diketahui dan plot A terhadap c. Garis kuadrat terkecil A = m·c + b memberikan kemiringan m = εl. Baca sampel dari c = (A − b)/m. R² mendekati 1 (di atas sekitar 0,995) menunjukkan garis lurus yang baik. Percayai hasil hanya di dalam rentang standar Anda.
Contoh soal
Konsentrasi NADH
NADH memiliki ε = 6220 L mol⁻¹ cm⁻¹ pada 340 nm. Sampel dalam sel 1,00 cm terbaca A = 0,311.
c = A/(εl) = 0.311 / (6220 × 1.00)
c = 5,00 × 10⁻⁵ M = 50,0 µM
Transmitansi ke absorbansi
Suatu larutan meneruskan 25,0% cahaya. Cari A.
A = 2 − log₁₀(25.0) = 2 − 1.398
A = 0,602
Cari ε (gaya AP)
Larutan zat warna 2,50 × 10⁻⁵ M dalam sel 1,00 cm memiliki A = 0,452.
ε = A/(lc) = 0.452 / (1.00 × 2.50 × 10⁻⁵)
ε = 1,81 × 10⁴ L mol⁻¹ cm⁻¹
Pengenceran plus Beer–Lambert (gaya JEE)
Larutan stok diencerkan 10 kali. Larutan encer memberikan A = 0,250 dengan ε = 5000 L mol⁻¹ cm⁻¹ dan l = 1 cm.
c encer = 0.250/5000 = 5.0 × 10⁻⁵ M. Kalikan dengan faktor pengenceran.
Stok = 5,0 × 10⁻⁴ M
Sampel dari kurva kalibrasi
Standar 0 hingga 50 µM memberikan A = 0.01231·c + 0.0013 (R² = 0,99998). Sampel terbaca A = 0,300.
c = (0.300 − 0.0013) / 0.01231
c ≈ 24,3 µM (ε ≈ 1,23 × 10⁴ L mol⁻¹ cm⁻¹)
Gandakan panjang lintasan
A = 0,40 dalam sel 1 cm. Larutan yang sama dimasukkan ke sel 2 cm.
A sebanding dengan l, sehingga A menjadi dua kali lipat.
A = 0,80 (%T turun dari 39,8% menjadi 15,8%)
Satuan dan kesalahan umum
- Panjang lintasan dalam cm. 10 mm = 1 cm. Sel 5 mm adalah 0,5 cm, bukan 5.
- Konsentrasi dalam mol/L. Ubah µM atau mM terlebih dahulu, atau biarkan kalkulator melakukannya. Jika ε diberikan per mg/mL (atau sebagai A untuk 1 mg/mL), gunakan konsentrasi massa.
- Absorbansi tidak bersatuan. Jangan menulis "A = 0,5 M". Satuan ε meniadakan satuan l dan c.
- Gunakan log basis 10. A = −log₁₀T. Memakai ln menghasilkan nilai 2,303 kali terlalu besar.
- %T atau T. T berupa pecahan (0,25). %T berupa persentase (25). A = −log T = 2 − log %T.
- Tetap di rentang linear. Sebagian besar spektrofotometer andal untuk A antara sekitar 0,1 dan 1,0. Di atas sekitar 1,5, cahaya sesat dan efek kimia membelokkan kurva. Encerkan sampelnya.
- Blangko terlebih dahulu. Nolkan instrumen dengan pelarut (dan pereaksi) sehingga A hanya berasal dari analit.
- Ukur pada λmaks. ε bergantung pada panjang gelombang. Gunakan panjang gelombang yang sama untuk standar dan sampel.
Menulis laporan praktikum spektroskopi? Gambar kromofor dan skema reaksi Anda di MolDraw, editor struktur kimia online gratis.
Buka editor MolDrawPertanyaan yang sering diajukan
Apa itu hukum Beer–Lambert?
Hukum ini menyatakan bahwa absorbansi sebanding dengan konsentrasi dan panjang lintasan: A = εlc. Jika konsentrasi atau panjang lintasan dilipatgandakan, absorbansinya juga berlipat dua. Hukum ini berlaku baik untuk larutan encer pada satu panjang gelombang.
Apa satuan absorptivitas molar ε?
L mol⁻¹ cm⁻¹ (juga ditulis M⁻¹ cm⁻¹). Satuan ini membuat A = εlc tak bersatuan jika l dalam cm dan c dalam mol/L. Zat warna yang menyerap kuat memiliki ε di atas 10⁴; transisi d–d yang lemah bisa di bawah 100.
Bagaimana cara mengubah transmitansi menjadi absorbansi?
A = −log₁₀T, atau A = 2 − log₁₀(%T). Misalnya 50% T menghasilkan A = 0,301, 10% T menghasilkan A = 1, dan 1% T menghasilkan A = 2.
Mengapa kurva kalibrasi saya tidak lurus pada absorbansi tinggi?
Di atas sekitar A = 1 hingga 1,5, sangat sedikit cahaya yang mencapai detektor, sehingga cahaya sesat dan derau berpengaruh. Larutan pekat juga dapat menunjukkan interaksi antarmolekul. Encerkan sampel ke rentang linear.
Apa arti kemiringan grafik absorbansi vs konsentrasi?
Kemiringannya sama dengan εl. Dengan sel 1 cm, kemiringan (dalam L/mol) adalah absorptivitas molar ε. Jika konsentrasi dalam µM, bagi kemiringan dengan 10⁻⁶ untuk mendapatkan ε dalam L mol⁻¹ cm⁻¹.
Haruskah garis kalibrasi melalui titik nol?
Idealnya ya, setelah koreksi blangko. Intersep kecil wajar karena kesalahan blangko dan kuvet. Kalkulator ini mencocokkan intersep alih-alih memaksanya nol, dan memakainya saat mencari konsentrasi sampel.
Alat kimia terkait
Terakhir diperbarui: