Mẫu đồng vị trong khối phổ: cách đọc M+1, M+2 và cụm halogen
Trả lời ngắn: Mẫu đồng vị là cụm pic mà một phân tử tạo ra vì các nguyên tử của nó có nhiều đồng vị. Carbon đóng góp khoảng 1,1% của M cho mỗi carbon tại M+1. Một chlorine cho M : M+2 ≈ 3 : 1, một bromine ≈ 1 : 1, và lưu huỳnh đóng góp 4,4% tại M+2. CH₂Cl₂ cho 100 : 64 : 10 tại m/z 84, 86 và 88. Máy tính mẫu đồng vị miễn phí tính mẫu chính xác cho mọi công thức hoặc SMILES, kèm adduct, độ phân giải và so sánh với phổ của bạn.
Các thuật ngữ chính
| Mẫu đồng vị | Cụm pic mà một phân tử tạo ra trong khối phổ vì các nguyên tử của nó có nhiều đồng vị khác nhau. |
|---|---|
| M, M+1, M+2 | M là ion đơn đồng vị. M+1 và M+2 nặng hơn 1 và 2 đơn vị khối lượng. |
| Khối lượng đơn đồng vị | Khối lượng tính bằng đồng vị phổ biến nhất của mỗi nguyên tố. Caffeine C₈H₁₀N₄O₂: 194,0804. |
| Khối lượng trung bình | Khối lượng tính bằng nguyên tử khối chuẩn. Caffeine: 194,19 g/mol. |
| Khối lượng danh định | Khối lượng nguyên tính từ các đồng vị phổ biến nhất. Caffeine: 194. |
| Năng suất phân giải | R = m/Δm, trong đó Δm là độ rộng pic tại nửa chiều cao (FWHM). |
Quy tắc kinh nghiệm về đồng vị
| Nguyên tố | Đồng vị nặng | Độ phổ biến tự nhiên | Ảnh hưởng đến mẫu đồng vị |
|---|---|---|---|
| C | ¹³C | 1.07% | M+1 ≈ 1,1% của M cho mỗi carbon |
| N | ¹⁵N | 0.36% | M+1 ≈ 0,37% cho mỗi nitrogen |
| O | ¹⁸O | 0.20% | M+2 ≈ 0,2% cho mỗi oxygen |
| S | ³⁴S | 4.25% | M+2 ≈ 4,4% cho mỗi lưu huỳnh |
| Cl | ³⁷Cl | 24.24% | M : M+2 ≈ 3 : 1 cho mỗi chlorine |
| Br | ⁸¹Br | 49.31% | M : M+2 ≈ 1 : 1 cho mỗi bromine |
| F, P, I, Na | không có | 100% một đồng vị | không có pic phụ |
Với nhiều halogen, hãy khai triển nhị thức. Với n chlorine, mẫu xấp xỉ là (3 + 1)ⁿ. Hai Cl cho 100 : 64 : 10, ba Cl cho 100 : 96 : 31 : 3, hai Br cho 51 : 100 : 49 và ba Br cho 34 : 100 : 97 : 32.
Mẫu đồng vị chính xác được tính như thế nào
Mỗi nguyên tố đóng góp một đa thức nhỏ: khối lượng các đồng vị cùng độ phổ biến của chúng. Với chlorine là 0,7576 (khối lượng 35) + 0,2424 (khối lượng 37). Phân tử có n nguyên tử chlorine nâng đa thức này lên lũy thừa n. Sau đó đa thức của mọi nguyên tố được nhân với nhau. Cách làm này gọi là tích chập đa thức.
Máy tính mẫu đồng vị làm điều này chính xác cho mọi đồng vị bền của mọi nguyên tố và giữ khối lượng trung bình của mỗi pic. Nó chỉ bỏ các số hạng nhỏ hơn 10⁻¹² so với số hạng lớn nhất. Với phổ profile, nó còn giữ cấu trúc tinh tế, nên các pic chênh nhau vài mDa có thể tách ra ở năng suất phân giải cao.
Cách dùng máy tính mẫu đồng vị
- Mở máy tính mẫu đồng vị.
- Chọn Loại đầu vào: Công thức phân tử hoặc SMILES. Nhập vào ô Công thức hoặc SMILES, ví dụ
C6H5BrhoặcPt(NH3)2Cl2. - Chọn Loại ion: M+• cho EI, [M+H]⁺, [M+Na]⁺ hoặc [M+K]⁺ cho ESI dương, [M−H]⁻ hoặc [M+Cl]⁻ cho chế độ âm, hoặc ion như đã viết cho công thức mang điện như
[Pt(NH3)4]2+. - Đọc khối lượng đơn đồng vị, khối lượng trung bình và khối lượng danh định, pic mạnh nhất và các giá trị M+1, M+2 cùng ước tính theo quy tắc kinh nghiệm.
- Đặt Hiển thị thành Profile (chọn độ phân giải) và nhập Năng suất phân giải (m/Δm) để xem hình dạng trên thiết bị của bạn.
- Mở So sánh với phổ đo được, dán các cặp m/z và cường độ của bạn và đọc kết luận về mức khớp. Nhấn Tải ví dụ để thử.
- Lưu bằng Tải SVG, Tải PNG hoặc Tải CSV.
Ví dụ có lời giải
1. Dichloromethane, CH₂Cl₂
Các ion ³⁵Cl₂, ³⁵Cl³⁷Cl và ³⁷Cl₂ xuất hiện tại m/z 84, 86 và 88. Tỉ lệ = 0,7576² : 2 × 0,7576 × 0,2424 : 0,2424² = 100 : 64 : 10. Pic M+1 nhỏ (1,1%) đến từ một carbon.
2. Bromobenzene, C₆H₅Br
M tại m/z 156 và M+2 tại m/z 158 theo tỉ lệ 100 : 97,5, vì ⁷⁹Br và ⁸¹Br chiếm 50,69% và 49,31%. M+1 là 6,5% do sáu carbon.
3. Caffeine trong phun điện tử ion dương
C₈H₁₀N₄O₂ có khối lượng đơn đồng vị 194,0804. Thêm một proton (1,00728) cho [M+H]⁺ tại m/z 195,0877. M+1 bằng 10,3% của M: 8 × 1,08% từ carbon cộng 4 × 0,37% từ nitrogen.
4. Fullerene C₆₀
Khối lượng đơn đồng vị 720,0000. Với 60 carbon, M+1 bằng 65% và M+2 bằng 21% của M. Trên khoảng 90 carbon, M+1 sẽ cao hơn M.
5. Vancomycin, C₆₆H₇₅Cl₂N₉O₂₄
[M+H]⁺ tại m/z 1448,4375. 66 carbon làm M+1 khoảng 77% và hai chlorine đẩy M+2 lên khoảng 98%, nên M, M+1 và M+2 cao gần bằng nhau.
6. Cisplatin, Pt(NH₃)₂Cl₂
Platin có bốn đồng vị chính (¹⁹⁴Pt 32,9%, ¹⁹⁵Pt 33,8%, ¹⁹⁶Pt 25,2%, ¹⁹⁸Pt 7,4%). Kết hợp với Cl₂, cụm pic trải từ m/z 296 đến 306 và pic cao nhất ở m/z 300, không phải ở pic đơn đồng vị 299.
Bảng tóm tắt: mẫu đồng vị cho bạn biết điều gì
| Những gì bạn thấy | Nguyên nhân có khả năng |
|---|---|
| M+1 ≈ 1,1% × n của M | n nguyên tử carbon |
| M+2 ≈ 33% của M | một chlorine |
| M+2 ≈ M | một bromine |
| M : M+2 : M+4 ≈ 100 : 64 : 10 | hai chlorine |
| M : M+2 : M+4 ≈ 1 : 2 : 1 | hai bromine |
| M+2 ≈ 4 đến 5% của M | một lưu huỳnh |
| Các pic đồng vị cách nhau 0,5 | một ion 2+ |
| Cụm rộng gồm nhiều pic | một kim loại có nhiều đồng vị (Sn, Pt, Hg, Ru, Pd) |
Lỗi thường gặp
- So sánh pic ESI với khối lượng của phân tử trung hòa. Hãy cộng hoặc trừ adduct trước.
- Dùng khối lượng trung bình cho phép đo phân giải cao. HRMS đo m/z đơn đồng vị.
- Cho rằng M luôn là pic cao nhất. Phân tử lớn và nhiều kim loại có pic cao nhất nằm trên M.
- Quên khối lượng electron khi tính m/z chính xác. Nó bằng 0,000549 Da cho mỗi điện tích, đáng kể ở mức ppm.
- Viết CO cho cobalt hoặc CL cho chlorine. Hãy dùng Co và Cl.
Mẹo khi đi thi
- A-level và IB: một cặp pic 3 : 1 cách nhau hai đơn vị nghĩa là một Cl; cặp 1 : 1 nghĩa là một Br. Ba pic 1 : 2 : 1 nghĩa là hai Br; 9 : 6 : 1 nghĩa là hai Cl.
- A-level: số carbon ≈ (chiều cao M+1 / chiều cao M) × 100 / 1,1.
- AP Chemistry: khối phổ của nguyên tố cho trực tiếp độ phổ biến đồng vị. Nguyên tử khối trung bình = Σ (khối lượng đồng vị × tỉ lệ).
- JEE và NEET: luyện tính nguyên tử khối trung bình từ dữ liệu đồng vị, ví dụ Cl: 0,7576 × 34,969 + 0,2424 × 36,966 = 35,45.
- Đại học: dùng khối lượng chính xác (trong phạm vi 5 ppm) cùng mẫu đồng vị để chọn giữa các công thức ứng viên, và dùng các pic A+2 để đếm S, Cl và Br.
Kiểm tra mọi công thức bằng máy tính mẫu đồng vị, rồi so sánh với phổ của bạn trong trình xem phổ khối lượng.
Hỏi và đáp
Mẫu đồng vị trong khối phổ là gì?
Đó là nhóm pic mà một phân tử tạo ra vì các nguyên tử của nó tồn tại dưới dạng nhiều đồng vị khác nhau. Chiều cao tương đối của M, M+1, M+2, v.v. phụ thuộc vào các nguyên tố và số lượng của mỗi nguyên tố.
Làm sao nhận ra chlorine và bromine trong khối phổ?
Một chlorine cho M và M+2 theo tỉ lệ 3 : 1. Một bromine cho M và M+2 theo tỉ lệ 1 : 1. Hai chlorine cho 100 : 64 : 10, và hai bromine cho khoảng 1 : 2 : 1.
Làm sao tìm số nguyên tử carbon từ pic M+1?
Chia chiều cao M+1 (tính theo phần trăm của M) cho 1,1. M+1 bằng 11% nghĩa là khoảng 10 carbon. Mỗi nguyên tử nitrogen đóng góp khoảng 0,37%, nên hãy trừ phần đó trước nếu có N.
Khối lượng đơn đồng vị của caffeine là bao nhiêu?
Caffeine, C₈H₁₀N₄O₂, có khối lượng đơn đồng vị 194,0804 và khối lượng trung bình 194,19. Ion [M+H]⁺ của nó xuất hiện tại m/z 195,0877.
Vì sao với phân tử lớn, pic cao nhất không phải pic đơn đồng vị?
Mỗi carbon có xác suất 1,07% là ¹³C. Với khoảng 90 carbon trở lên, phần lớn phân tử chứa ít nhất một ¹³C, nên pic M+1 trở nên cao hơn M.
Chế độ centroid và profile khác nhau thế nào?
Chế độ centroid hiển thị một vạch cho mỗi pic đồng vị. Chế độ profile hiển thị hình dạng pic thật với độ rộng do năng suất phân giải quyết định, FWHM = m/R, nên các pic gần nhau hòa vào nhau ở độ phân giải thấp và tách ra ở độ phân giải cao.
Vì sao với một số ion, các pic đồng vị cách nhau 0,5?
Khoảng cách là 1/z. Ion mang hai điện tích như [M+2H]²⁺ có các pic đồng vị cách nhau 0,5 m/z, và ion mang ba điện tích có các pic cách nhau 0,33.